中國(guó)水產(chǎn)門戶網(wǎng)報(bào)道鮑肌肉萎縮癥病毒（Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus，AbSV）能夠引起鮑肌肉萎縮癥。AbSV傳染性強(qiáng)，可感染各種規(guī)格雜色鮑。AbSV病來(lái)勢(shì)兇猛，從癥狀出現(xiàn)到全部死亡通常只需要3天，該病現(xiàn)已蔓延至廣東、廣西、海南和臺(tái)灣等省區(qū)，并在1999年至2005年間每逢冬季、春季反復(fù)暴發(fā)，對(duì)我國(guó)南方雜色鮑養(yǎng)殖業(yè)造成了毀滅性打擊。
由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所漁業(yè)生物病害防治研究室姜敬哲副研究員主持研發(fā)的鮑肌肉萎縮癥病毒核酸檢測(cè)試劑盒，與傳統(tǒng)的PCR檢測(cè)方法相比，能夠更快速、更靈敏、更簡(jiǎn)便地檢測(cè)出AbSV，為及時(shí)防治鮑肌肉萎縮癥提供參考依據(jù)。
試劑盒靈敏性比普通PCR高100倍~1000倍
姜敬哲介紹說(shuō)，鮑肌肉萎縮癥病毒核酸檢測(cè)試劑盒主要運(yùn)用了環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（loop-mediated isothermal amplification, LAMP），這是一種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法。與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比，該試劑盒對(duì)儀器的要求低，PCR技術(shù)需要嚴(yán)格控制升溫降溫、價(jià)格昂貴的PCR儀，而試劑盒只要一個(gè)簡(jiǎn)單的恒溫裝置例如水浴鍋等，就能實(shí)現(xiàn)反應(yīng)；反映時(shí)間短，在60℃~65℃條件下，一小時(shí)內(nèi)就能完成核酸擴(kuò)增反應(yīng)，而PCR反應(yīng)需要至少兩個(gè)小時(shí)；結(jié)果觀察也非常簡(jiǎn)單，試劑盒使用SYBR GreenⅠ熒光染料，這種染料只與雙鏈DNA小溝結(jié)合，所以如果反應(yīng)結(jié)果為陽(yáng)性，肉眼可直接觀察到綠色熒光，不像普通PCR方法需要進(jìn)行凝膠電泳才能觀察結(jié)果。試劑盒的靈敏性也比普通PCR反應(yīng)要高，是普通PCR靈敏度的100倍~1000倍。
借助設(shè)備現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)快捷方便
“我們的目的是研制出一種適合現(xiàn)場(chǎng)、基層快速檢測(cè)的方法。雖然這個(gè)試劑盒跟傳統(tǒng)方法相比簡(jiǎn)化了檢測(cè)步驟，檢測(cè)試驗(yàn)已經(jīng)完全可以在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行，但由于樣品前處理步驟比較繁瑣，需要用到一些專業(yè)設(shè)備，因此如果要得到更靈敏、更準(zhǔn)確的結(jié)果有條件的情況下最好在有嚴(yán)格無(wú)菌條件的實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行�！苯凑軐�(duì)試劑盒的情況進(jìn)行了補(bǔ)充說(shuō)明。
需要在實(shí)驗(yàn)室里操作的主要是從鮑魚組織中提取DNA的步驟，實(shí)驗(yàn)室方法取出的DNA純度高，用來(lái)檢測(cè)靈敏度也會(huì)高；如果在室外，也可使用簡(jiǎn)便的方法提取DNA。例如將鮑魚組織剪碎后用堿水（NaOH溶液）浸泡，也可以得到DNA，但這種方法得到的DNA雜質(zhì)多，純度低，用來(lái)檢測(cè)病毒就不夠靈敏了。除了DNA提取，后續(xù)的加樣過(guò)程如果不是專業(yè)的操作很可能會(huì)污染，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
“不過(guò)，最近有專業(yè)的公司推出了LAMP檢測(cè)配套設(shè)備，配合使用前期的核酸提取試劑盒，無(wú)需在實(shí)驗(yàn)室也無(wú)需專業(yè)人員操作，從DNA提取到獲取靈敏精準(zhǔn)的結(jié)果，都可以完成了。這種設(shè)備適用于大型鮑苗生產(chǎn)企業(yè)、漁醫(yī)漁藥公司、飼料企業(yè)、水產(chǎn)技術(shù)推廣站、大型養(yǎng)殖場(chǎng)、水產(chǎn)品加工企業(yè)等�！苯凑苷f(shuō)，“結(jié)合我們的試劑盒和該套檢測(cè)設(shè)備，已經(jīng)完全能夠勝任AbSV的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程僅需2個(gè)小時(shí)。在病毒濃度很低時(shí)就檢測(cè)出來(lái)，讓鮑魚養(yǎng)殖戶在早期就對(duì)飼料、苗種、親鮑等進(jìn)行快速檢測(cè)，進(jìn)而就可采取相應(yīng)措施來(lái)降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)，減小損失�！�
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