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1、病原體
嗜水氣單胞菌(A.hydrophila),革蘭氏陰性短桿菌,極端單鞭毛,沒有芽孢和莢膜,剛從病魚上分離的病原菌常兩個相連。普通瓊脂平板上的菌落圓形,邊緣光滑,中央凸起,肉色、灰白色或略帶淡桃紅色,有光澤,發(fā)育很好;在MacConkey培養(yǎng)基和SS培養(yǎng)基上發(fā)育也很好。發(fā)育可能溫度為5~40.5℃,28℃最適;pH6~11內(nèi)均可生長,最適pH為7.2~7.4;在含鹽0~4%范圍內(nèi)均可生長,最適鹽度為0.5%左右,含鹽4.5%不生長。氧化酶陽性,細(xì)胞色素氧化酶陽性,過氧化氫酶陽性,產(chǎn)生硫化氫,V.P.試驗陽性,MR試驗因菌株而不同,丁二醇脫氫酶陽性,產(chǎn)生吲哚,還原硝酸鹽,尿素酶陰性,不利用丙二醇;發(fā)酵葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、海藻糖、淀粉、糊精、肝糖、甘油、甘露糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣;不發(fā)酵木糖、山梨糖、菊糖、松三糖、阿東糖醇、半乳糖醇及肌醇;液化明膠,消化酪蛋白,消化萊弗爾氏血清,石蕊牛乳產(chǎn)酸、凝固、胨化;水解淀粉,磷酸酶陽性,脂肪酶陽性,卵磷脂酶陽性,利用檸檬酸鹽,精氨酸脫氫酶陽性,鳥氨酸脫羧酶陽性,氰化鉀試驗陽性,p型溶血(馬、羊紅細(xì)胞),產(chǎn)生毒素。
2、流行情況
主要經(jīng)過腸道感染;經(jīng)多次用菌液浸浴不受傷及人工創(chuàng)傷的鰻鱺,均不感染發(fā)病,因此認(rèn)為不易發(fā)生經(jīng)皮、經(jīng)鰓感染。帶菌鰻鱺是主要傳染源;嗜水氣單胞菌為條件致病菌,能存在于富含有機物的水及底泥中。在養(yǎng)鰻池中廣泛存在,當(dāng)水質(zhì)惡化,水溫劇變,捕撈、搬運后魚體受傷,或越冬后期魚體抵抗力下降時,鰻鱺的腸壁上皮細(xì)胞發(fā)生退行性變化、脫落、崩解,這些崩解物成為細(xì)菌的很好營養(yǎng),嗜水氣單胞菌大量繁殖,因而容易暴發(fā)流行。鰻鱺、鯉、鯽等溫水性淡水魚都易感染;爬行動物的蛇、甲魚及兩棲類蛙也易感染;采用人工接種方法,哺乳動物的小白鼠、豚鼠、兔也有感染性。
3、癥狀及病理變化
軀干和頭部的腹側(cè)皮膚、臀鰭發(fā)紅,胸鰭也常發(fā)紅,隨著病情的發(fā)展而出現(xiàn)出血點和出血斑;嚴(yán)重時全面明顯發(fā)紅,軀干背部和背鰭有時也發(fā)紅,但有時瀕死的魚仍只有輕微發(fā)紅;病魚不吃食,靠近池壁靜止不動,有的頭部向上,無力地“豎游”,多數(shù)在幾天內(nèi)就死亡。腹腔壁常有點狀出血;肝臟由于嚴(yán)重淤血而呈暗紅色,有時也可看到出血斑;在肝門靜脈周圍,常可看到大范圍的肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性,以至壞死;在血管周圍常有大量淋巴樣細(xì)胞;脾臟淤血、腫大;當(dāng)體表出血嚴(yán)重時,鰓、肝、腎、脾的顏色變淡,病魚嚴(yán)重貧血。腎臟的病變常較嚴(yán)重,腎小球毛細(xì)血管淤血、出血,腎小球上皮細(xì)胞剝離,腎小球崩解,腎小體囊腔內(nèi)出現(xiàn)蛋白質(zhì)樣物質(zhì);腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生混濁腫脹,滴狀玻璃樣變,以至壞死、崩解;間質(zhì)中淤血嚴(yán)重。心肌纖維間嚴(yán)重出血。腸壁局部或全腸充血,失去彈性,腸內(nèi)沒有食物,而有黃色或乳白色帶血的粘液狀物,其中含有壞死脫落的腸上皮細(xì)胞和血細(xì)胞;在上皮細(xì)胞層和基膜之間,以及固有膜內(nèi)有淋巴細(xì)胞和吞噬細(xì)胞等浸潤,毛細(xì)血管充血,固有層出血,嚴(yán)重時腸粘膜皺襞的頂端壞死、崩解,以至全面崩解。病魚貧血,紅細(xì)胞數(shù)減少,紅細(xì)胞比積降低,血液中水分增加,血糖、血清蛋白和血清鈣量降低,紅細(xì)胞沉降率增加。
4、診斷
鰻魚的軀干、鰭等處發(fā)紅、出血的疾病,除赤鰭病外,還有鰻愛德華氏病、鰻紅點病及弧菌病等,且常幾種病混合感染,因此僅從病魚的外表癥狀不能作出正確診斷,必須進行細(xì)菌檢查,常規(guī)分離、鑒定,費時太長,快速診斷可采用:
(1)直接熒光抗體法(FA)
①制備熒光抗體:用熒光色素標(biāo)記家兔嗜水氣單胞菌抗血清的球蛋白(注意抗血清必須是抗體效價高、無交叉反應(yīng),并經(jīng)過提純;熒光抗體制備后也必須進行處理,以消除其非特異性反應(yīng)成分,并要進行測定,以確定其特異性染色強度及非特異性反應(yīng)的有無;制備好后,加0.01%硫柳汞,-20℃可長期保存)。
②制備病魚的病變組織壓印片,干燥后,通過火焰3次固定。
③將熒光抗體滴加在壓印片上,放密閉濕盒中,37C恒溫30~60分鐘,然后用pH7.2的磷酸鹽緩沖液(PBS)輕輕地充分洗滌,冷風(fēng)吹干。
④加1滴緩沖甘油,蓋上蓋玻片封片。
⑤在熒光顯微鏡下觀察,如出現(xiàn)熒光,即可確診患此病。
(2)間接熒光抗體法(1FA)
①制備家兔抗魚血清熒光抗體:把魚的血清注到家兔體內(nèi),制備家兔抗魚血清抗體,并用熒光色素標(biāo)記。
②在載玻片上,放一環(huán)嗜水氣單胞菌菌液,讓其自然鋪開,冷風(fēng)吹干,在火焰上通過3次固定,滴加病魚血清,令其蓋滿標(biāo)本,放密閉濕盒中,37℃恒溫30分鐘,然后用0.1mol/LpH8.0的PBS液輕輕沖洗3次.再按順序浸泡于PBS液三缸中,每缸5分鐘,取出再輕輕沖洗3次,冷風(fēng)吹干。
③在上述載玻片上滴加家兔抗魚血清熒光抗體,令其蓋滿標(biāo)本,置密閉濕盒中,37℃恒溫30分鐘,如上法浸泡和洗滌,然后再用蒸餾水輕輕漂洗3次,冷風(fēng)吹干,加l滴緩沖甘油液,蓋上蓋玻片封片。
④在熒光顯微鏡下觀察,如出現(xiàn)熒光,即可確診。
(3)瓊脂凝膠擴散試驗根據(jù)沉降線圖形不同而進行鑒別。
(4)鑒別培養(yǎng)基
①Rimler—Shotts培養(yǎng)基(R—S培養(yǎng)基):將分離材料接種在R—S培養(yǎng)基上,37C培養(yǎng),20小時后觀察,嗜水氣單胞菌發(fā)育成純黃色菌落。水中和魚體上存在的細(xì)菌,形成同樣菌落的,只有檸檬酸細(xì)菌屬(Citrobacter)及變形桿菌的一部分。
②MccoyandPilcher(1974)設(shè)計了較簡單的鑒別培養(yǎng)基:
細(xì)菌胨10g細(xì)菌肉精10g
肝糖4g氯化鈉5g
十二烷硫酸鈉0.1g溴麝香草酚藍(lán)0.1g
瓊脂15g蒸餾水1L
pH6.9~7.1
培養(yǎng)基加熱溶解并稍冷,加入分離材料,混勻后倒人培養(yǎng)皿,冷卻凝固后,表面再覆蓋一薄層2%瓊脂,25C培養(yǎng)1天,嗜水氣單胞菌形成大的黃色菌落,殺鮭氣單胞菌,形成點狀的黃色菌落。
5、預(yù)防措施
(1)同赤皮病的預(yù)防方法。
(2)用下述治療用內(nèi)服藥,連喂3天。
6、治療方法
(1)外用藥:任意選用下列一種:
①全池遍灑呋喃唑酮,使池水成(0.2~0.5)×10-6濃度。
②全池遍灑漂白粉濃度為(1~1.2)×10-6,或漂粉精濃度為(0.5~0.6)×10-6,或優(yōu)氯凈濃度為(0.5~0.6)×10-6,或三氯異氰尿酸濃度為0.4×10-6。
(2)內(nèi)服藥:任意選用1種:
①每100千克魚每天投喂魚泰8號藥飼3kg,分上、下午兩次投喂,連喂5~7天。
②每100千克魚每天用呋喃唑酮1~3g拌飼分兩次投喂,連喂7~10天。
⑧每100千克魚每天用磺胺-6-甲氧嘧啶或磺胺-2,6-二甲氧嘧啶15~20g拌飼分兩次投喂,連喂7~10天。
④每100千克魚每天用氯霉素或四環(huán)素1.5~2.0g拌飼分兩次投喂,連喂7~10天。
防治方法
(1)每立方米水體用漂白粉1克,全池遍灑。
(2)每立方米水體用痢特靈0.3~0.5克,全池遍灑。
(3)每100千克鰻魚用舒鰻1號藥物10克拌飼投喂,每天投喂2次,連喂7天。
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