【編者按】諾卡氏菌病是一種典型危害嚴重的慢性細菌病，多發于海水魚和淡水養殖的大口黑鱸、斑醴、烏醴等大宗養殖品種。此前少有關注，近年來在我國南方如廣東、福建和浙江等省有大范圍蔓延趨勢，危害日益嚴重。有人認為此病的流行與養殖大環境、養殖密度、投喂餌料、魚種質量、濫用藥物均有很大關系。目前暫無較好藥物控制，水產病害防治單位及養殖戶應引起重視。
 
    為此，本刊特邀中山大學、珠江水產研究所及南海水產研究所等專家共同探討此病的防治措施，以期對業界有所幫助。
 
    “早期診斷，及早發現魚苗期的諾卡氏菌隱性感染，以致實施早期的衛生管理和藥物預防是該病防治的關鍵。”
 
    文/圖 中山大學生命科學學院水生經濟動物研究所 李安興
 
    魚類諾卡氏菌病是一種慢性、病程漫長、危害性極大的暖水魚類病害，最易受感染的養殖魚類是魳魚、大口黑鱸、卵形鯧鰺、大黃魚和烏鱧（黑魚或生魚）。近年，諾卡氏菌病在我國南方如廣東、福建和浙江等省大有蔓延趨勢，極嚴重地威脅著當地相關魚類品種養殖的健康發展，應引起水產主管部門和專業人士的高度重視。
 
    諾卡氏菌感染在苗期或初期通常是隱性的，極不易被發現。感染和發病過程極其漫長，通常在成魚期才出現典型癥狀和顯著性危害。諾卡氏菌病的病程很長，是因為該菌在魚體內的生長繁殖速度很慢，在出現癥狀或引起魚死亡之前需要很長增殖發育期和漫長的病程。感染諾卡氏菌的魚群的養殖結果可能是產量大大降低，飼料轉化很低，在夏末或收獲季節，魚體況不佳，十分瘦弱，死亡率增高。如大口黑鱸魚的養殖戶常常遇到這樣的問題，本來希望將大規格的商品魚養到市價高的時候才將其上市出售，但往往在上市前遭遇諾卡氏菌病暴發，使眼看將獲得良好效益的整塘魚損失殆盡。

    一、病原
 
    在淡水、咸淡水或海水環境中，有多種諾卡氏菌存在，但鰤魚諾卡氏菌是最主要的一種。該細菌不引起敗血癥或急性免疫反應，但漸進性侵襲魚類各種細胞包括白細胞。有關魚類諾卡氏菌的微生物學、組織化學和病理生理學信息很少，這可能因為與其菌體生長緩慢有關。
 
    二、傳播和流行病學
 
    小魚初期感染諾卡氏菌可能來源于冰鮮餌料魚或者由病魚水平傳播而來，和病魚或被感染魚一起飼養也是傳播疾病的方式之一。有研究表明，黃尾魳在與病魚飼養在一起，3個月后出現臟器病變即結節性病變，而不顯示體表病變。小魚一旦感染，其細菌即在魚體主要器官如肝臟、腎臟、脾臟緩慢繁殖、隱性增長。另一方面，魚體被腹腔注射活細菌后2周即出現死亡。PCR檢測結果發現養殖環境中的貝類通常攜帶大量諾卡氏菌；但是，尚不能確認這些貝類是魚類諾卡氏菌的感染來源，還是因為魚類感染諾卡氏菌后，貝類從環境中簡單地富集到這些細菌的緣故。

    在海水魚類的養殖中，諾卡氏菌的感染進程似乎在夏天水溫24℃以上時要快一些，但諾卡氏菌病的病例和所致的死亡在秋末和冬初似乎要明顯一些，這可能與養殖密度高和魚體免疫狀況低下有關。

    三、臨床癥狀和眼觀病變
 
    典型的外部癥狀是病魚消瘦，皮膚結節和潰瘍病變，鰓蓋糜爛，鰓絲基部出現干酪樣結節和壞死灶（圖１）。內部器官呈現的白色結節病變，初易于分枝桿菌（魚結核病）和發光桿菌病（巴氏桿菌病或假結核病）的病變相混淆，特別是在混合感染時。白色結節通常1-2mm大小，在腎臟、脾臟和肝臟最為明顯和多見（圖３，圖４），也可發現于其他器官。在魚體體質好時，結節可以慢慢固化而痊愈。固化的結節呈黑色硬結（黑色素巨噬細胞聚集之故）。
 

        圖5  在LOWENSTEIN-JENSEN選擇性培養基上生長的諾卡氏菌菌落

 
   四、細菌學特征
 
   細菌呈線性、串珠狀和分枝形態。革蘭氏陽性著染，抗酸染色陽性（粉紅色）。諾卡氏菌可以在多種培養基上生長，但這些培養基也可適合其他細菌生長，且生長速度往往比諾卡氏菌要快很多，所以在病原分離時一定要杜絕雜菌的污染，否則很難分離到真正的病原菌，因為雜菌生長迅猛，很快就將真正病原的諾卡氏菌覆蓋了，難以被發現。可以用選擇培養基如Lowenstein-Jensen培養基，能有效地分離該菌，在25℃-35℃中培養需要4-10天，菌落呈干奶酪樣（圖５）。
 
   在體外進行的藥敏試驗對生產上往往意義不大或造成誤導，因為在藥敏試驗時，諾卡氏菌常常對多種抗生素具有抗性。
 
   五、診斷和現場檢測

   在現場，必須要對病魚進行細致的檢查，這對診斷該病至關重要，特別是徹底檢查皮膚和體表的硬結和潰瘍病變。切開病變部位，可以發現黃白色干酪樣膿腫灶，揭開鰓蓋，也可以發現鰓絲基部的不規則的白色膿腫灶。在鰓、腎臟或脾臟都可以發現白色結節性干酪樣壞死灶，這些壞死灶的印片染色檢查可以發現革蘭氏陽性或抗酸染色的細菌（圖６，圖８）。10%福爾馬林固定的組織切片檢查也可以發現壞死灶病變和細菌（圖７）。
 
      圖6  病魚脾臟印片，顯示大量的呈絲狀、分枝狀的桿菌
 
 
      圖7  病魚腎臟組織切片，顯示臟器中的壞死結節的組織結構，壞死中心（N）和邊緣的結締組織包囊（箭頭）(H.E染色，×200)
 
    圖８  脾臟的組織印片Ziehl-Neelsen抗酸桿菌染色法圖片，顯示大量串珠形絲狀細菌（箭頭）(×1000)
 
   六、防治
 
    該病最好的控制方法是疫苗免疫。然而，諾卡氏菌病的疫苗正在研發中，尚沒有商品化疫苗可資使用。因而，早期診斷，及早發現魚苗期的諾卡氏菌隱性感染，以致實施早期的衛生管理和藥物預防是該病防治的關鍵。但是，目前還缺乏很有效的方便快速的診斷方法，有些高靈敏度的PCR檢測技術和血清學檢測方法的操作費時費力，且十分昂貴，不太適合于現場的診斷和檢測。
 
    利用藥物控制諾卡氏菌病的方法也受到很大的爭議，因為抗生素藥物固然具有一定效果，但用藥時間需要很長，有時要在感染魚群中使用長達數月的藥物方能有效控制該病的發生，這樣就給食品安全和環境安全帶來嚴重隱患和威脅。消費者絕對不喜歡長期用藥的水產品，盡管這些藥物都是國標漁藥。況且，一旦漁民養成了用藥的習慣和慣例，免不了他們會超量使用抗生素和偷偷使用一些違禁藥物，這些都是水產品生產中極其危險的行為，我們要堅決杜絕。
 
    同時，在使用抗生素治療諾卡氏菌病的過程是增加養殖生產成本的過程，因為一方面是藥物的成本，另一方面是魚生長緩慢拉高了生產成本。所以，利用抗生素防治諾卡氏菌病需要謹慎從之。

    那么，防治魚類諾卡氏菌病是不是就束手無策了呢？也不盡然；我們可以在魚苗階段嚴格控制該菌的感染和疾病發生，即小心謹慎地將2種抗生素交替使用于感染了諾卡氏菌，但尚未出現癥狀的魚苗期，這樣操作應該是很有效的。但很關鍵的問題是成魚階段一定要停藥，減少或杜絕藥物在上市規格魚中的殘留。