2008年以來(lái)，整整7年時(shí)間，羅非魚(yú)鏈球菌病一直困擾著羅非魚(yú)養(yǎng)殖，可謂是“高溫殺手”。直到現(xiàn)在，對(duì)于羅非魚(yú)鏈球菌病也一直沒(méi)有一個(gè)切實(shí)有效的治療方案。


7月22日早上6點(diǎn)，《當(dāng)代水產(chǎn)》記者從南京巨豹生物工程有限公司秦生巨老師處獲悉喜訊：秦老師已經(jīng)成功分離出鏈球菌噬菌體！


這就意味著，鏈球菌病“高溫殺手”的“魔咒”即將被打破。以下是本刊記者第一時(shí)間連線秦生巨老師，關(guān)于這一重大發(fā)現(xiàn)的詳細(xì)采訪。


《當(dāng)代水產(chǎn)》：我們都知道您一直在做蛭弧菌、噬菌體這方面的研究，但對(duì)鏈球菌噬菌體專項(xiàng)研究較少聽(tīng)聞，為什么會(huì)您會(huì)想到去做這方面的工作？這個(gè)分離實(shí)驗(yàn)做了多長(zhǎng)時(shí)間才成功的？


秦生巨：雖然很多一線朋友反映目前水產(chǎn)養(yǎng)殖鏈球菌病很厲害，非常棘手，沒(méi)有有效的防控措施。中科院珠江水產(chǎn)研究業(yè)內(nèi)人士建議我是否從噬菌體生物防控方面做些工作。但我因?yàn)楣ぷ鞅容^忙，一直沒(méi)有時(shí)間去做這項(xiàng)工作。這次做鏈球菌噬菌體的分離，也是受一個(gè)契機(jī)的影響。


去年年初在海南開(kāi)會(huì)，很多朋友跟我說(shuō)，受到鏈球菌的影響，現(xiàn)在羅非魚(yú)的養(yǎng)殖很令人惱火，好多塘都不敢養(yǎng)，用抗生素還好，如果不用抗生素，70%-80%都會(huì)死的，很厲害。但用了抗生素，藥物就超標(biāo)。所以他們也希望我能在這方面能夠有什么方法解決這個(gè)問(wèn)題。


我也實(shí)地走訪了一些養(yǎng)殖戶和養(yǎng)魚(yú)的塘口，看出這個(gè)問(wèn)題確實(shí)比較嚴(yán)重，所以我就下決心花點(diǎn)時(shí)間試一下鏈球菌噬菌體的分離工作。就這樣才做出來(lái)的這個(gè)決定，前后花了1年多的時(shí)間。


要進(jìn)行鏈球菌噬菌體分離工作，必須要有經(jīng)過(guò)分離鑒定確認(rèn)是水產(chǎn)品致病的菌種，在這方面得到了水科院珠江所的支持。


另外，要分離獲得這一類(lèi)噬菌體，只有在鏈球菌病害高發(fā)區(qū)的水體中才容易獲得。所以要從廣東、廣西、海南等地的去采集樣本，去做分離實(shí)驗(yàn)。到今天為止已經(jīng)檢測(cè)100多份水樣，花了1年多時(shí)間，終于分離獲得了鏈球菌噬菌體。噬菌體暫定名：HN48/SS130920，HN48/SS130920噬菌體在平板中形成的噬菌斑如下圖。用于分離的宿主菌無(wú)乳鏈球菌SS130920菌種由水科院珠江所提供。




圖為透亮空斑點(diǎn)為無(wú)乳鏈球菌HN/SS130920噬菌體噬菌斑

圖為無(wú)乳鏈球菌SS130920對(duì)照無(wú)噬菌體噬菌形成


《當(dāng)代水產(chǎn)》：這次成功分離出來(lái)的鏈球菌噬菌體是哪種鏈球菌？可以應(yīng)對(duì)哪些水產(chǎn)品的鏈球菌病？

秦生巨：在醫(yī)學(xué)上重要的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌、無(wú)乳鏈球菌等。目前引起水生動(dòng)物鏈球菌病的主要是無(wú)乳鏈球菌為主。無(wú)乳鏈球菌在魚(yú)的、蝦的、海豚等動(dòng)物體內(nèi)都有分離到，其中在羅非魚(yú)身上的反應(yīng)是很強(qiáng)的。所以我們分離獲得HN48/SS130920無(wú)乳鏈球菌噬菌體對(duì)羅非魚(yú)鏈球菌病的控制提供重要的科學(xué)依據(jù)和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。


《當(dāng)代水產(chǎn)》：一個(gè)典型的噬菌體的侵染細(xì)菌的過(guò)程，可以分為三個(gè)階段：感染階段、增殖階段和成熟階段。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果上看，鏈球菌噬菌體感染鏈球菌細(xì)胞需要多長(zhǎng)時(shí)間？


秦生巨：鏈球菌噬菌體侵染鏈球菌的細(xì)胞的時(shí)間很短，只需要幾分鐘就可以完成，環(huán)境合適30分鐘就可以復(fù)制一次，比蛭弧菌感染宿主的過(guò)程要短得多，蛭弧菌一個(gè)感染過(guò)程是2-4個(gè)小時(shí)。所以一旦能夠應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)際中，效果將會(huì)很顯著。


《當(dāng)代水產(chǎn)》：噬菌體有利有弊，在吞噬鏈球菌細(xì)胞的同時(shí)，是否會(huì)對(duì)水體中其他有益菌細(xì)胞造成影響？


秦生巨：不會(huì)，絕對(duì)不會(huì)！噬菌體具有高度的特異性，是一對(duì)一的，一不可能對(duì)二。它是以特定的宿主菌細(xì)胞為靶標(biāo)，只要侵染成功，它的作用是100%的。所以，鏈球菌噬菌體只會(huì)對(duì)鏈球菌起作用，不會(huì)對(duì)其他的菌細(xì)胞起作用。


《當(dāng)代水產(chǎn)》：目前是處于實(shí)驗(yàn)階段，預(yù)計(jì)投入生產(chǎn)需要多長(zhǎng)時(shí)間？產(chǎn)品大概會(huì)在什么時(shí)間面市？在實(shí)際應(yīng)用中如何使用？


秦生巨：小范圍的試用試驗(yàn)會(huì)馬上進(jìn)行，但是真正要投入使用，還需要一些時(shí)間，至少要等到明年以后。


因?yàn)槭删�體是分離獲得了，但它的相關(guān)生物學(xué)特性還要進(jìn)行進(jìn)一步研究。如果今年這些工作都能夠完成，明年生產(chǎn)成產(chǎn)品，那就很不錯(cuò)了。


至于產(chǎn)品的使用方式，可以拌料，也可以潑灑到水體中。對(duì)于已經(jīng)在體內(nèi)感染的魚(yú)，拌料可以從腸道中進(jìn)行充分感染，這些產(chǎn)品從苗種就可以應(yīng)用。


《當(dāng)代水產(chǎn)》：我們都知道，現(xiàn)在鏈球菌病并沒(méi)有根治的方法，只能盡可能減少損失。鏈球菌噬菌體的成功分離，對(duì)于羅非魚(yú)鏈球菌病，是否能夠起到根本性的根治作用？


秦生巨：說(shuō)到根治，不能這樣下結(jié)論，應(yīng)該說(shuō)是完全有可能控制羅非魚(yú)鏈球菌病的發(fā)生和流行。因?yàn)橐�根治，涉及到一個(gè)使用方法的問(wèn)題。還需要配合相關(guān)的水體條件，在所有方法、條件都滿足，那就可以100%解決問(wèn)題，也就是所謂的可以根治。


比如說(shuō)，水溫，在一定條件下，水溫的高低影響到鏈球菌噬菌體的效果。因?yàn)槲以谧錾�長(zhǎng)培育的時(shí)候，在研究實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，鏈球菌噬菌體最適合的生長(zhǎng)溫度是35-37℃，這時(shí)它的生長(zhǎng)繁殖速度是最快的，效果是最佳的。外環(huán)境溫度再高，可能超過(guò)40℃甚至更高，但是水溫一般很難超過(guò)30℃，不會(huì)超過(guò)35℃。


所以我現(xiàn)在擔(dān)心的不是水溫過(guò)高的問(wèn)題，擔(dān)心的是水溫過(guò)低，如果水溫低于20℃，它的效果會(huì)很差。