中國水產(chǎn)門戶網(wǎng)報(bào)道萼花臂尾輪蟲的培養(yǎng)技術(shù) 

    摘 要：萼花臂尾輪蟲是水產(chǎn)苗種開食和早期培育階段的優(yōu)良餌料，可以在淡水中培養(yǎng)。傳統(tǒng)養(yǎng)魚的肥水下塘經(jīng)驗(yàn)，是利用藻類、輪蟲、枝角類等的混合群體供餌，利弊兼有。本研究采用單胞藻、酵母及光臺(tái)細(xì)菌單獨(dú)培養(yǎng)萼花臂尾輪蟲，可獲得純凈的適口餌料，為工廠化育苗提供餌料保證。

　　關(guān)鍵詞 ：萼花臂尾輪蟲

   培養(yǎng)技術(shù) ：生物餌料、 酵母、 光合細(xì)菌

　　萼花臂尾輪蟲(Brachionus calyciflorus)隸屬臂尾輪蟲科Brachionidae、臂尾輪蟲屬Brachionus，系池塘、湖泊、江河中常見的浮游動(dòng)物，一般近岸較多。萼花臂尾輪蟲體型較小，體長一般為100-500μm；體壁由一層表皮細(xì)胞、皮下肌肉及皮層(由表皮細(xì)胞分泌出的骨蛋白稍稍硬化后形成)所組成；它的繁殖力強(qiáng)，世代交替快(通常僅6d)，一年的大部時(shí)間由雌體進(jìn)行孤雌生殖；運(yùn)動(dòng)緩慢，速度一般小于0．02cm/s，適合于水產(chǎn)動(dòng)物的幼苗攝食。萼花臂尾輪蟲的地理分布范圍廣，對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng)、易于大量培養(yǎng)，所以已成為許多水產(chǎn)動(dòng)物幼體的重要餌料，特別是作為魚、蝦、蟹類幼體的開口餌料。

　　目前，水產(chǎn)動(dòng)物育苗生產(chǎn)中大量培養(yǎng)的輪蟲主要是褶皺臂尾輪蟲(B．plicatilis)，但在純淡水中培養(yǎng)褶皺臂尾輪蟲難度很大。萼花臂尾輪蟲可以在純淡水中繁殖生長，我國傳統(tǒng)養(yǎng)殖技術(shù)中的魚苗“發(fā)塘”所強(qiáng)調(diào)的肥水下塘，實(shí)質(zhì)上就是以土池培養(yǎng)包括萼花臂尾輪蟲在內(nèi)的天然開口餌料混合種群。隨著養(yǎng)殖技術(shù)的逐步精深，對(duì)優(yōu)質(zhì)的開口餌料要求分離培養(yǎng)，萼花臂尾輪蟲可作為批量生產(chǎn)的首選種。

　　一、種的分離和保種

　　培養(yǎng)萼花臂尾輪蟲所需的種可以自己分離，也可向有關(guān)單位購買。在溫暖季節(jié)(水溫＞15℃)，用浮游生物網(wǎng)(200目)從池塘溝渠中撈取浮游生物樣品，在解剖鏡下比較容易將輪蟲分離。為避免其它浮游動(dòng)物的混入，可先將輪蟲吸于一清潔的玻片上，經(jīng)觀察后再轉(zhuǎn)到小的三角燒瓶或燒杯中，以保證輪蟲種的純度。將分離出來的純凈萼花臂尾輪蟲分成幾個(gè)小單位分別進(jìn)行培養(yǎng)，防止可能發(fā)生的污染等情況而使輪蟲培養(yǎng)失敗，從而保持并儲(chǔ)備數(shù)量充足的原種。分離出的輪蟲種可以連續(xù)培養(yǎng)保存，也可以冬卵的形式保藏。當(dāng)環(huán)境條件惡化時(shí)輪蟲就會(huì)出現(xiàn)混交雌體，此時(shí)產(chǎn)出的卵叫冬卵。冬卵經(jīng)受精后分泌出一層比較厚的卵殼(借以抵抗不良環(huán)境)，形成休眠卵。每一個(gè)混交雌體可能同時(shí)或陸續(xù)產(chǎn)生休眠卵或可以孵出雄體的冬卵。休眠卵的份量較重，常下沉到水底，也有浮在水面的，有的留在母體上，隨母體一同下沉。這種卵可以耐受干燥、高溫、冰凍及水質(zhì)的劇烈變化。萼花臂尾輪蟲主要依靠休眠卵越冬，因此可用冬卵的形式保種。

　　二、冬卵的孵化

　　萼花臂尾輪蟲冬卵的孵化及培養(yǎng)用水應(yīng)事先用80×10-6濃度的漂白粉溶液消毒，然后再用250目篩絹過濾。冬卵一般可從當(dāng)?shù)氐�水池塘的底泥中采集，先放在小燒杯或三角燒瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，在適宜溫度(20℃±)下經(jīng)5—7d的培養(yǎng)后取其上清液，經(jīng)反復(fù)分離、過濾、篩選即可獲得較純凈的輪蟲。

　　三、培養(yǎng)及管理

　　1．培養(yǎng)容器

　　常用的培養(yǎng)容器有：各種玻璃器皿，不同規(guī)格 的水族箱，大小不同的水桶，水泥池或土池等。培養(yǎng)容器使用前應(yīng)經(jīng)嚴(yán)格消毒處理。玻璃器體積較小，可將其直接放入鍋中，加水煮沸，燒煮30min即可；規(guī)模培養(yǎng)用的大型容器及培養(yǎng)池等一般采用化學(xué)消毒法。常用消毒藥品為漂白粉、高錳酸鉀等。

　　漂白粉 ：大型容器、工具可使用20x10-6漂白粉進(jìn)行浸泡消毒，1h后經(jīng)清水3～4次沖洗即可使用。大型培養(yǎng)池，特別是土池，可配成高濃度漿糊狀溶液淋撒池壁，24h后可進(jìn)清水使用。

　　高錳酸鉀 ：用10 x10-6濃度的溶液分幾次淋灑池壁。為防止氧化錳附著，應(yīng)在消毒30min后用清水沖洗干凈。此法比較適用于小型容器及水泥池。

　　2．培養(yǎng)用水

　　培養(yǎng)用水亦須嚴(yán)格消毒。前期培養(yǎng)用水量較少，可采取高溫煮沸法；大面積培養(yǎng)，水體須用藥物消毒，常用藥物為漂白粉。漂白粉可以殺死大部分?jǐn)澈ι�物及藻類，具體用量為80 x10-6，因其藥效消失快，故經(jīng)5—7d充分充氣后即可使用。但在正式使用前，應(yīng)以少量輪蟲試水，確認(rèn)輪蟲無不良反應(yīng)后方可接種。

　　3．接種

　　輪蟲的接種密度一般以2～5個(gè)/mL為宜。在適宜的溫度、餌料、溶氧、光照等條件下，經(jīng)8～10 d即可擴(kuò)大培養(yǎng)或收獲。

　　4．餌料投喂

　　培養(yǎng)萼花臂尾輪蟲的餌料以單胞藻及有機(jī)碎屑為主。當(dāng)光照條件較好時(shí)，可在培養(yǎng)輪蟲的容器內(nèi)先加入營養(yǎng)鹽，以培育單胞藻，待容器內(nèi)的水稍具顏色后再接種輪蟲。在培養(yǎng)過程中，保持一定光照條件是非常必要的；但隨著輪蟲密度的增加，單胞藻和有機(jī)碎屑已不能滿足輪蟲的營養(yǎng)需要，因此必須作補(bǔ)充投餌。目前培養(yǎng)輪蟲較理想的餌料為單胞藻、海洋酵母、面包酵母、啤酒醉母和光合細(xì)菌等。關(guān)于單胞藻的培養(yǎng)技術(shù)，國內(nèi)外有不少報(bào)道，在此不再贅述。

　　面包酵母可從酵母廠或食品廠購到。一般用鮮酵母，也可用于酵母及酵母片(食母生)，鮮酵母應(yīng)低溫保存。投喂前先絞碎，經(jīng)250目篩絹過濾，投喂量為0．01g／萬個(gè)輪蟲·d，日投兩次。也可用光合細(xì)菌和鮮酵母混合投喂。光合細(xì)菌對(duì)輪蟲的種群增長具有明顯的促進(jìn)作用，投喂量為5x106—10x106個(gè)m1。并根據(jù)培養(yǎng)中的具體情況及輪蟲胃中內(nèi)含物的多少來調(diào)節(jié)投餌量，以吃飽且略有剩余為宜，過多或不足都不利于輪蟲的增殖。

　　在小水體中培養(yǎng)輪蟲，投喂酵母后應(yīng)輕輕攪拌，使之分布均勻，并能增加水體的溶氧量。采用稍大水體進(jìn)行輪蟲培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)連續(xù)充氣，以保證培養(yǎng)水體中的溶氧量，并可防止餌料下沉；但充氣量不宜過大，以利輪蟲的快速生長和繁殖。

　　5．溫度控制

萼花臂尾輪蟲適溫范圍較廣，其最適生長溫度為25—30℃。為使培養(yǎng)的輪蟲達(dá)到最快的生長繁殖速度，應(yīng)注意保溫加溫。

　　6．水質(zhì)控制

　　輪蟲的生長發(fā)育和繁殖與水質(zhì)關(guān)系很大。在培養(yǎng)過程中，隨著輪蟲密度的增加、餌料密度的變化以及輪蟲排泄物的積累，水體中的理化因子會(huì)發(fā)生明顯的變化，所以應(yīng)定時(shí)觀測水質(zhì)，及時(shí)補(bǔ)加新水。
　　7．輪蟲的擴(kuò)大培養(yǎng)

　　在適宜的溫度、光照，充足的餌料，良好的水質(zhì)及合理的培養(yǎng)方法下，經(jīng)10d左右的培養(yǎng)，當(dāng)輪蟲的密度達(dá)到200個(gè)/ml以上時(shí)，即可進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)或采收。

　　8．營養(yǎng)強(qiáng)化

　　用酵母培養(yǎng)的尊花臂尾輪蟲，其缺點(diǎn)是缺乏(6—3系列不飽和脂肪酸，特別是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，而這兩種營養(yǎng)成分對(duì)魚類的生長、抗病力及成活率都有重要的影響。因此，用酵母培養(yǎng)的輪蟲，使用前必需進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化。輪蟲的營養(yǎng)強(qiáng)化劑是從魚油、烏賊油等海洋動(dòng)物的脂肪中提取的，它含有多種不飽和脂肪酸及維生素，是經(jīng)乳化制成的乳濁液，能較好地溶于水。此外，還可投喂高濃度海洋微藻(小球藻、微綠球藻和螺旋藻)對(duì)輪蟲進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化。

　　四、采收

　　當(dāng)輪蟲的密度達(dá)到200個(gè)／ml以上時(shí)即可采收使用。可用200目篩絹制成的專門網(wǎng)具撈取；也可利用輪蟲的趨光特性進(jìn)行光誘，使輪蟲集群，然后進(jìn)行捕撈。為使輪蟲培養(yǎng)得以延續(xù)，應(yīng)確定合理的捕撈量，使水體中保持一定的輪蟲密度，以利再生產(chǎn)。

　　五、敵害生物的防治

　　輪蟲培養(yǎng)中最常見的敵害生物是纖毛蟲。當(dāng)輪蟲排泄物較多，酵母投喂過量時(shí)，水質(zhì)惡化，極易引起纖毛蟲大量繁殖。因此，在輪蟲的培養(yǎng)生產(chǎn)過程中，應(yīng)該防止水質(zhì)污染，保證輪蟲種的純凈，保持培養(yǎng)輪蟲的生長及數(shù)量優(yōu)勢(shì)；事先做好輪蟲種的分離及保藏。這是使輪蟲培養(yǎng)順利、生產(chǎn)持續(xù)進(jìn)行的關(guān)鍵。

　　若在輪蟲培養(yǎng)初期即出現(xiàn)纖毛蟲大量繁殖，干脆予以舍棄，重新培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中發(fā)生纖毛蟲病，應(yīng)減少酵母的投喂量。加大單胞藻的投喂量。用200目篩絹反復(fù)過濾，清水漂洗，可基本去除纖毛蟲。

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