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褶皺臂尾輪蟲的培養方法

發布時間:2004/1/6 15:40:00  來源:  編輯:南方漁網  我來說兩句我來說兩句(0)
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中國水產門戶網報道輪蟲(Rotifer)是一群微小的多細胞動物,種類繁多,廣泛分布于淡水、半咸水和海 水水域中,是水中浮游生物的主要組成部分,和魚類、甲殼類的重要的天然餌料生物,歷來 受到人們的重視。人們對輪蟲的生物學、人工培養和應用進行過許多的研究,其中以半咸水 種類—褶皺臂尾輪蟲(以下簡稱輪蟲)的研究最為深入,它具有生活力強、繁殖迅速、營養 豐富、大小適宜和容易培養等特點,可至少在60種海洋有鰭魚類和18種甲殼動物幼體的培養 過程中應用。

    一、輪蟲種的分離

  培養輪蟲首先需要有種輪蟲,種輪蟲可以由有關單位供應,也可以 自己分離。褶皺臂尾輪蟲生活在半咸水和海水中,當水溫達15℃以上,在海邊高潮區的小水 洼、小水塘等小型靜水體中,尤其水質較肥、浮游藻類繁生的水中,常生活著褶皺臂尾輪蟲 ?捎镁W目為120微米左右的浮游生物網(即一般捕撈浮游生物的粗網)在這些小水體中撈 取,最好是在清晨日出之前,輪蟲向表層游動時捕撈效果更佳。先用網目為300微米的尼龍 網濾掉其中的小魚、雜物,再集中于容器中放置數小時。利用輪蟲對缺氧或惡劣環境抵抗力 強的特性,待橈足類及其他浮游生物等死亡沉于水底時,再用紗布或濾紙平放水面使浮在水 上層的輪蟲粘附其上,取出紗布把輪蟲沖洗入另備的容器中,即可得到較純的輪蟲。按此方 法再經2次~3次分離之后,可得到純種輪蟲。也可把采集的水樣在解剖鏡下檢查,如發現褶 皺臂尾輪蟲,即用微吸管吸出。為了避免混雜其他動物,可先把吸出的水放置在一個清潔的 凹玻片中過濾,經觀察準確后再吸入試管或小三角燒瓶中培養。褶皺臂尾輪蟲個體較大,很 容易用吸管分離。在分離過程中應測定輪蟲原生活環境的鹽度,培養輪蟲用水的鹽度應該與 原生活環境的鹽度相近。因為褶皺臂尾輪蟲對鹽度的突然變化的耐力較低,待分離培養成功 后如需要改變培養鹽分,必須經過逐漸馴化過程。

    二、輪蟲休眠卵和孵化

  輪蟲種可以長期培養保存,也可以休眠卵的形式長期保藏。如 果采用后者,則在培養前首先必須把休眠卵孵化。
1.休眠卵孵化的環境條件

  對在黑暗條件下保存的休眠卵來說,光照是結束休眠的必需 條件。休眠卵能在1.5‰~35‰的鹽度范圍孵化,但以15‰~20‰的鹽度最適宜。在5℃~35 ℃的溫度范圍內,休眠卵都能孵化,但孵化的時間則隨溫度的不同而有明顯的差異,最適宜 的孵化溫度為20℃~25℃。同時,在孵化容器中加入少量扁藻或小球藻液,使水略呈很淡的 藻色,有利于孵化。

    2.休眠卵的孵化方法

  為了避免敵害生物的危害,消除小型甲殼動物,休眠卵孵化及培 養仔蟲的海水,需要用300目的篩絹網過濾,并加入淡水調節鹽度至最適范圍?捎酶鞣N玻 璃培養缸、小水族箱作為孵化容器,容器在使用前應清洗、消毒,再用過濾海水沖洗干凈, 然后加入孵化用海水,再加入少量藻液,把少量輪蟲休眠卵放入海水中孵化。休眠卵中混雜 有大量的藻渣,用量太多易引起水質變壞。孵化容器應放置在靠近窗口或有人工照明的位置 。孵化期間每天攪拌水體1次~2次。如果條件適宜,一般在3天~7天的時間內即可孵化。在 孵化缸內存在著大量死藻渣,水質不好,孵化后的仔蟲應吸移到備用的培養容器中培養。

  三、培養方式依培養條件的人為控制程度分為粗養和精養;依培養和收獲的特點分為一次性培養、半連續培養和連續培養,還有大面積土池培養等。下面介紹兩種常用的培養方式:半連續培養和大面積土池培養。

  四、半連續培養半連續培養是目前培養輪蟲常用的方式,以下介紹一種典型的以水泥池為培養容器的半連續培養方式。

  1.培養池分為輪蟲培養池和單胞藻餌料培養池兩種,均為室外水泥池,兩種池的容量大約以1∶2的比例配套使用。輪蟲培養池的容量為30立方米或40平方米,池深1.4米(有效水深1.2米)。單胞藻培養池的容量為100立方米~200立方米。

  2.培養單胞藻餌料把輪蟲和單胞藻餌料培養池洗凈,消毒,灌水,施肥,培養單胞藻餌料。

  3.接種當藻類餌料繁殖達到較大濃度時,以每毫升水體接入輪蟲種30個~50個的數量,把輪蟲種接入輪蟲培養池。

  4.培養接種輪蟲后,充氣培養。輪蟲除攝食池內單胞藻餌料外,還應投喂一些面包酵母,每天投喂量為每100萬個輪蟲投喂酵母1克~1.2克,分上、下午兩次或多次投喂。先把酵母在桶中加水攪拌均勻后再潑入水中,如果是用活性干酵母,需用電動攪磨機把團粒狀的酵母干加水攪打成分離的單個酵母細胞(在水中呈懸浮狀態)再投喂。

  5.采收培養4天~5天后,輪蟲的密度超過100個/毫升時,每天采收水容量的20%~35%。收獲時,可用網目小于100微米的篩絹網制成約40升容量的網箱,網箱高40厘米,外有一方木框支撐,網箱捆緊在木框架內,張開。把網箱連同木框架放在一個高為20厘米的大塑料盆中,用虹吸法把池水用管吸出,流入網箱內過濾。待網箱內輪蟲密度大時,用塑料勺舀取作為餌料投喂或作為種輪蟲繼續培養。采收后立即從單胞藻餌料池抽取藻液入輪蟲培養池補回采收的水量,并繼續投喂酵母,充氣培養,可每天采收一部分。由于輪蟲培養池中的殘餌、輪蟲糞便等物質會隨著培養天數的增加而增多,使水質逐漸惡化,因此每次培養時間一般能維持15天~25天,最多30天,然后全部采收,清池,開始新一輪的培養。

  五、大面積土池培養我國的魚、蝦育苗場大都擁有一定量的土池,利用土池培養輪蟲技術較易掌握,成本低,收獲量大,輪蟲質量好。

  1.培養池培養池的選址,要求排灌水方便,在鹽度較高的海域最好有淡水源,在必要時可調節海水鹽度。培養池的大小和數量主要依育苗生產的需要決定。一般年產2億尾中國對蝦蝦苗的育苗場,配4口~5口面積為1畝~2畝的輪蟲培養池。如育苗數量大,也可以用面積為10畝~15畝的養蝦池培養輪蟲。池的底質以不滲漏的泥質或泥砂質為好,要求池底平整,圍堤堅固,池的有效水深為1米~1.2米?刹捎盟脛恿μ崴,也可在閘門安裝250目或300目密篩絹過濾網,漲潮時海水經過濾后進入池內。

  2.清池 清池方法有兩種:一種為干水清池,即把池水排干,在烈日下暴曬3天~5天,即可達到清池目的,如果認為有必要,可再用清池藥液,部分或全部潑灑池底和池壁;另一種為帶水清池,即培養池連同池水一起消毒,按水體量加入藥物殺死敵害生物,池水沒有浸泡到的池壁,則用清池藥液潑灑消毒。常用的清池藥物有以下幾種:

  (1)漂白粉 漂白粉的有效氯含量為25%~30%,貯存時間太長會失效,因此在使用前必須測定其有效氯含量。清池的漂白粉用量為60克/立方米,使用時先加少量水調成糊狀,再加水稀釋潑灑。漂白粉清池可殺死魚類、甲殼動物、藻類和細菌。清池后藥效維持3天~5天,然后消失。

 。2)氨水 農用氨水含氯量為15%~17%,清池的氨水用量為250ppm,稀釋后潑灑。氨水清池可殺死魚類、甲殼動物及其他動物。清池后2天~3天藥效消失。

  (3)五氯酚鈉 清池的五氯酚鈉用量為2ppm~4ppm,用水溶解后均勻潑灑,可殺死魚類、甲殼動物、螺類和水草。數小時后藥效消失。

  3.灌水 藥效消失之后,即可灌水入池。灌入池中的海水,必須通過250目或300目的密篩絹網過濾,以清除敵害生物。池塘一次進水不宜過多,第一次進水約20厘米~30厘米,隨后逐步增加。

  4.施肥培養單胞藻餌料 灌水后即施肥培養單胞藻餌料。采用有機肥和無機肥混合使用的方法,可使輪蟲培養池在相當長的時間內維持肥效,以供應藻類大量繁殖的營養需要。有機肥的種類很多,但以發酵雞糞的效果較為理想。雞糞必須發酵,盡量避免使用新鮮雞糞。近些年,隨著工廠化養雞業的發展,一些單位將雞糞篩選、,高溫干燥后制成以雞糞為主的魚用飼料,如能使用這種雞糞,效果更佳。一般每畝池施發酵雞糞100公斤~150公斤為基肥。如果是雞糞發酵飼料,施肥量可減少30%。施肥時,先將50%的雞糞肥均勻撒于池內,其余50%堆在池溏四周,依靠雨水使肥分緩慢地流入池中或作日后追肥用。施好基肥后每畝再施2公斤尿素和0.5公斤過磷酸鈣。

  在清池過程中,除殺死輪蟲的敵害生物之外,輪蟲的餌料--單細胞藻類也被殺死。施肥培養單細胞藻類需要有藻種,有條件的可以接種人工培養的優良藻種(如海水小球藻、扁藻等)入池培養。但由于土池的面積大,需要藻種的數量很大,一般難以解決。因此,在土池培養輪蟲多利用在納入天然海水時帶進來的各種藻類作為培養種。所以,就是帶水清池的培養池也要納入(或水泵提水)部分海區的新鮮海水,以解決培養的藻種問題。施肥培養單細胞餌料,一般經4天~7天藻類即可繁殖起來。當藻類數量太大,池水透明度低于20厘米時,可隔天加水5厘米~10厘米。當池水水位升高到50厘米時,即可接入輪蟲種。在培養過程中,根據藻類生長情況,每隔5天~7天,以同樣的量追化肥一次。

  5.接種 輪蟲的接種量,一般以0.5個/毫升~1個/毫升較為適宜。可以把經不斷擴大培養的種輪蟲或把輪蟲繁殖已達高峰的培養池的輪蟲,連池水帶輪蟲抽入池中接種。

  6.維持藻類餌料的數量在適宜的范圍 土池培養輪蟲,一般是不投餌的,輪蟲主要攝食施肥培養的藻類餌料。由于培養的藻類餌料的增殖有一定限度,輪蟲的密度不能過高,否則培養的藻類餌料就會一下子被吃光,因缺乏餌料而導致輪蟲的大量死亡。為了平衡兩者的關系,一般控制輪蟲的密度在5個/毫升~20個/毫升之間,每天將超出部分收獲,另一方面通過施、追肥,維持藻類的增殖,以補充輪蟲的消耗,使藻類餌料的增殖量和輪蟲的消耗量基本保持平衡,培養才能正常進行。

  7.采收 輪蟲的采收可用200目篩絹做成拖網,沿池邊拖曳采收;也可在池面上設一浮筏,其上安裝一個用200目篩絹制成的網箱,用一個小型水泵,把池水抽入網箱過濾;還可利用褶皺臂尾輪蟲趨光的特點,利用光誘,使輪蟲大量聚集在光強處,輪蟲集中的地方呈褐紅色,可用水桶直接舀取。

  六、輪蟲休眠卵的采收和保藏 褶皺臂尾輪蟲兩性生殖產生的休眠卵,便于運輸和貯存。人們習慣以休眠卵的形式貯藏、保存種輪蟲,當需要時,取出孵化,即可獲得輪蟲種。目前,在生產中誘發兩性生殖形成休眠卵的方法,是以高的種群密度和饑餓刺激相結合進行。即先以常規方法培養出輪蟲,不采收,待輪蟲數量達高峰時,突然停止投喂餌料,并停止充氣,池中的餌料很快就會耗盡,即會出現兩性生殖,產生大量休眠卵。其次,還可改變鹽度或溫度,促進輪蟲產生休眠卵。把低溫條件下培養的輪蟲放到加溫至29℃~30℃的培養液中,每兩天反復操作一次,通過溫度刺激,可以人為地促使輪蟲產生大量休眠卵。

  輪蟲產生休眠卵后,可每隔兩天取池底沉積物進行鏡檢,待休眠卵數量較大,而且不繼續增多時,即可采收。首先,把上層池水用虹吸法吸出,吸至剩下10厘米左右的水深,然后把池底沉積攪起,連同池水排出,經300目以上的篩絹過濾,再用清潔海水反復沖洗,盡可能把藻渣除去。把休眠卵和部分藻渣的混合物稍加陰干,然后裝瓶蠟封。也可不陰干,連水稍加濃縮裝瓶,加蓋。

  裝瓶封裝的輪蟲休眠卵,放在低于5℃的冷藏箱內保存,可保存1年~2年,有的休眠卵保存8年以上仍具有孵化能力,可見休眠卵能耐受惡劣環境的時間是相當長的。休眠卵也可以不吸出,保留在原培養容器或原池中保存。原池水不能排去,也不能更換新水。若需要再培養時,把原池水排掉大部分(注意保留底部休眠卵),換入新鮮海水,并加入少量藻液,池中的休眠卵即可孵化,從而獲得大量種輪蟲。但原池保存休眠卵,由于病、敵害生物的危害,存活率不高。 
 
編輯:南方漁網 訪問人次:6792 關鍵字:輪蟲,  >> 更多資訊進入水產新聞網
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